جمع الدم وفصل البلازما

جمع الدم

لإجراء اختبارات السيرولوجيا، المناعية، وعلم الدم، من الضروري جمع الدم من الحيوان خلال الاختبار. نظرًا للتشابه العالي بين النظام الدوري في القوارض ونظام الإنسان، يمكن الحصول على معلومات قيمة. الدم يتدفق في جميع أنحاء الجسم ويتصل تقريبًا بجميع الخلايا. لذا، فإن التغيرات في أجزاء مختلفة من جسم الحيوان تؤثر على الدم، ومعظم هذه التغيرات يمكن تتبعها. توجد طرق متعددة لجمع الدم من الحيوانات. بعض هذه الطرق تؤدي إلى جمع كامل حجم الدم، مما يؤدي في النهاية إلى وفاة الحيوان. لذلك، يتم اختيار طريقة جمع الدم حسب حجم الدم المطلوب وما إذا كان يجب أن يبقى الحيوان حيًا لمزيد من الاختبارات. يمكن جمع الدم من مواقع مختلفة مثل الذيل، الوريد السافن، العين، القلب، وغيرها. يجب ملاحظة أن جمع الدم من الحيوان في حالة اليقظة قد يزيد من مستوى التوتر ويؤدي إلى تغييرات في العوامل البيوكيميائية للحيوان. لذا، من الأفضل، للحصول على نتائج أكثر دقة، تخدير الحيوان قبل إجراء جمع الدم. عمومًا، يبلغ حجم الدم في القوارض حوالي 10% من وزن الجسم أو تقريبًا 55 إلى 80 مل لكل كيلوغرام من وزن الجسم. ومع ذلك، قد ينخفض هذا المقدار بنسبة تصل إلى 15% في الحيوانات المسنّة مقارنة بالشباب. الحد الأقصى من الدم الذي يمكن استخراجه من القوارض يتراوح بين 6% إلى 8%، وإزالة هذا المقدار ستؤدي إلى وفاة الحيوان. بالإضافة إلى ذلك، فإن الحد الأقصى من الدم الذي يمكن جمعه دون التسبب في ضرر للحيوان هو حوالي 1% من إجمالي وزن الجسم. الفترة الزمنية المطلوبة لإعادة جمع الدم هي أسبوعان.

في جمع الدم من الحيوانات المختبرية، يجب تجنب إزالة إبرة الحقنة فجأة من القلب أو الوريد، حيث يمكن أن يؤدي ذلك إلى انحلال كريات الدم الحمراء وإطلاق الهيموغلوبين ومركبات الألوان غير القابلة للفصل في الدم. علاوة على ذلك، عند نقل الدم من الحقنة إلى الأنبوب، يجب إزالة طرف الإبرة. للحصول على المصل، يتم جمع الدم في أنبوب خالٍ من أي مواد مضادة للتخثر ثم يتم طرده مركزيًا بعد تجلط الدم. للحصول على البلازما، يتم تعريض الدم لمواد مضادة للتخثر مثل EDTA أو الهيبارين ثم يتم طرده مركزيًا. المصل يفتقر إلى عوامل التخثر مثل الفيبرينوجين لأنه أثناء تحضير المصل يتجلط الدم وتترسب عوامل التخثر. ولكن في فصل البلازما، تكون عوامل التخثر موجودة.

المبادئ العامة لجمع الدم في الحيوانات

يجب وصف طريقة جمع الدم في البروتوكول المعتمد من لجنة أخلاقيات الحيوانات. يجب أن تكون هذه الطرق minimally مؤلمة ومرهقة. يمكن جمع عينات الدم تحت التخدير أو بدونه. من الضروري وجود تدريب كافٍ لجمع الدم باستخدام أي طريقة في أي نوع. عمومًا، تُسحب عينات الدم من الأوعية الدموية الوريدية أو الشريانية أو غرف القلب.

تعتبر وتيرة جمع الدم مهمة. مرة واحدة كل أسبوعين هي مثالية للحيوانات غير القارضة. قد تتطلب هذه الدراسة عدة عينات دم، باستخدام اللاغومورف (مثل الأرانب). الحد الأقصى للجمع غير المباشر للدم بدون استبدال السوائل هو 10% من إجمالي حجم الدم المتداول في الحيوانات البالغة والصحية، ويمكن تكرار الجمع بعد 3 إلى 4 أسابيع. إذا كانت هناك حاجة إلى عينات دم متكررة على فترات قصيرة، يمكن إزالة ما يصل إلى 0.6 مل لكل كيلوغرام في اليوم أو 1.0% من إجمالي حجم الدم في الحيوانات كل 24 ساعة.

إذا كانت الدراسة تشمل جمع عينات دم متكررة، يمكن الحصول على العينات من خلال كانولا مؤقتة. قد يساعد ذلك في تقليل الألم والتوتر لدى الحيوانات التجريبية. الحجم المقدر للدم في الحيوانات البالغة يتراوح من 55 إلى 70 مل لكل كيلوغرام من وزن الجسم. يجب توخي الحذر في الحيوانات المسنّة والسمينة. إذا تجاوز حجم جمع الدم 10% من إجمالي حجم الدم، قد تكون هناك حاجة لاستبدال السوائل. يُوصى باستخدام محلول رينجر اللاكتاتي (LRS) كأفضل بديل للسوائل من قبل المعاهد الوطنية للصحة (NIH). إذا تجاوز حجم جمع الدم 30% من إجمالي حجم الدم المتداول، يجب اتخاذ الاحتياطات اللازمة لضمان عدم تعرض الحيوان لنقص حجم الدم.