عزل واستخلاص الخلايا الطبيعية والجذعية والسرطانية من الحيوانات المختبرية
عزل الخلايا من أنسجة بشرية وحيوانية متنوعة
يمكن عزل الخلايا من أجل زراعتها في المختبر باستخدام عدة طرق. من بين أهم الإنزيمات المستخدمة في عملية الاستخراج هي الكولاجيناز، والتربسين، والديسباز، والبروتياز، التي تكسر المصفوفة خارج الخلوية. تُعرف الخلايا التي تُزرع مباشرة من الأنسجة المستهدفة باسم الخلايا الأولية (الجيل الأول). تمتلك معظم زراعات الخلايا، باستثناء تلك المأخوذة من الأورام، عمرًا محدودًا. يمكن إنشاء خط خلوي خالٍ من الشيخوخة من خلال طفرات عشوائية أو مستهدفة، مما يسمح بتكاثر غير محدود ويعمل كممثل لنوع خلوي محدد.
عزل الخلايا الميزنشيمية من الأنسجة الدهنية
لقد جذبت الخلايا الجذعية الميزنشيمية (MSCs) اهتمامًا كبيرًا بسبب خصائصها القيمة، مثل تعديل الجهاز المناعي، وإعادة بناء الأنسجة، وإمكانية التمايز إلى عدة أنواع. يتطلب استخدام هذه الخلايا الجذعية الميزنشيمية في الأبحاث، وخاصة في الأغراض السريرية، إنتاج كميات كبيرة من الخلايا الجذعية مع عدد قليل من التمريرات خلال فترة زمنية قصيرة. قد يوفر تطوير طريقة مُحسّنة ومعياريّة لعزل الخلايا الجذعية المستمدة من الأنسجة الدهنية على نطاق واسع حلًا لهذه التحديات.
يقدم هذا البروتوكول طريقة مركّبة (الهضم الإنزيمي والتفتيت الميكانيكي) كنهج معياري وسهل التطبيق للحصول على كميات كبيرة من الخلايا الجذعية الميزنشيمية. نعتقد أن دمج الطرق الإنزيمية والميكانيكية يمكن أن يعزز من المساحة السطحية المتاحة للأنسجة الدهنية، مما يسهل عملية الهضم الإنزيمي. إن استخدام هذه الطريقة يقلل من كمية الكولاجيناز المطلوبة ويؤثر بشكل طفيف على حيوية وإمكانية تمايز الخلايا الجذعية الميزنشيمية المستمدة من الدهون.
