||

: (CBA) مصفوفات الحبيبات السيتومترية

وهي اختبار متعدد المكونات عالي الإنتاجية لتحليل البروتينات

مقدمة:

تُعد مصفوفات الحبيبات السيتومترية (CBA) تقنية متقدمة تعتمد على مبدأ التدفق الخلوي، وتُستخدم لقياس عدة بروتينات قابلة للذوبان بشكل متزامن ضمن عينة واحدة صغيرة الحجم. تمثل هذه التقنية دمجًا مبتكرًا بين الاختبارات المناعية التقليدية وإمكانات التحليل المتعدد التي تتيحها أجهزة الفلوسيتومتر، ما يجعلها أداة قوية في دراسة البروتينات مثل السيتوكينات، الكيموكينات، عوامل النمو، والإنزيمات التحليلية الأخرى.

وعلى خلاف اختبار ELISA التقليدي، الذي يقيس مركبًا واحدًا فقط في كل بئر، تسمح تقنية CBA بتحليل أكثر من 30 هدفًا بيولوجيًا في آنٍ واحد ضمن نفس العينة، مما يجعلها ذات قيمة عالية في أبحاث المناعة، واكتشاف المؤشرات الحيوية، والتطبيقات التشخيصية السريرية.

 

مبادئ عمل تقنية CBA

يعتمد نظام CBA على استخدام حبيبات ميكروية (Beads) صغيرة الحجم (قطرها بين 5–8 ميكرومتر) ذات تمييز فلوري داخلي فريد لكل مجموعة. تُغطى هذه الحبيبات بأجسام مضادة نوعية ترتبط بالبروتينات المستهدفة في العينة.

بعد الحضانة مع العينة البيولوجية، تقوم الحبيبات بالتقاط البروتينات المستهدفة. ثم تُضاف أجسام مضادة كاشفة موسومة بصبغة فلورية مثل فيكويريثرين (PE).
يقوم جهاز الفلوسيتومتر بتحديد هوية كل مجموعة من الحبيبات بناءً على التمييز الطيفي الفلوري الداخلي، ثم يقيس شدة الفلورسنس الخارجي (PE)، الذي يتناسب طرديًا مع تركيز البروتين المرتبط.

 

التطبيقات البحثية والطبية لـ CBA

1 - أبحاث المناعة:

يُستخدم CBA على نطاق واسع في توصيف أنماط إفراز السيتوكينات من الخلايا المناعية المحفزة (مثل استجابات Th1/Th2/Th17).
يمكن قياس العديد من السيتوكينات في آنٍ واحد، مثل:
IL-2، IL-4، IL-6، IL-10، TNF-α، IFN-γ وغيرها، بهدف تقييم الاستجابات تجاه العدوى، اللقاحات، أو الحالات المناعية الذاتية.

2 - اكتشاف المؤشرات الحيوية (Biomarker Discovery):

في الأمراض المزمنة كالسرطان أو الالتهابات، تساعد CBA في تحديد لوحات متعددة من المؤشرات الحيوية لأغراض التشخيص أو التنبؤ.
على سبيل المثال، يمكن قياس تركيز VEGF، IL-8، وMMPs في مصل المرضى للكشف عن التغيرات البروتينية المرتبطة بالمرض.

3 - تطوير الأدوية:

تُستخدم CBA في الأبحاث الدوائية لمراقبة الاستجابات البيولوجية للعقاقير، خاصة التغيرات في مستويات السيتوكينات الالتهابية بعد إعطاء الأدوية البيولوجية أو العلاجات المناعية.

4- التشخيصات السريرية:

تم اعتماد بعض مجموعات CBA التجارية مثل BD CBA Human Inflammation Kit من قبل إدارة الغذاء والدواء الأمريكية (FDA) لقياس السيتوكينات في عينات المرضى.
تُستخدم هذه الفحوصات في متابعة حالات مثل:

  • الإنتان (Sepsis).

  • متلازمة إطلاق السيتوكينات (CRS).

  • الاضطرابات المرتبطة بفرط تنشيط الجهاز المناعي.