تصوير بإستخدام المجهر الفلوري (فلورسنت)

مقدمة:

يُعد التصوير باستخدام المجهر الفلوري من التقنيات واسعة الانتشار في الدراسات الخلوية، حيث يُستخدم لمراقبة العمليات الخلوية الدقيقة وتقييم تأثير العلاجات المختلفة على الكائنات الحية. في هذا النوع من المجاهر، تعتمد آلية العمل على الفلورة بدلاً من تشتت أو امتصاص أو انعكاس الضوء لدراسة خصائص العينات الحيوية وغير الحيوية.

يشير مصطلح "المجهر الفلوري" إلى أي نوع من المجاهر التي تستخدم ظاهرة الفلورة، سواء كان مجهرًا بسيطًا أو مجهرًا بؤريًا (Confocal microscope). تعتمد التقنية على تسليط ضوء بطول موجي محدد على العينة، مما يؤدي إلى امتصاص الجزيئات الفلورية (الفلوروفورات) لهذا الضوء وإعادة إصداره بطول موجي أطول. نظرًا لأن الضوء المنبعث يكون عادةً أضعف من الضوء الساقط، يتم استخدام فلاتر خاصة لعزله وتحديده بوضوح.

الفلورة:

الفلورة هي نوع من اللمعان يحدث عندما تصدر العينة ضوءًا بعد تعرضها لإشعاع كهرومغناطيسي. وتُعرف الجزيئات المسؤولة عن هذا الانبعاث بالفلوروفورات (Fluorophores). عادةً ما تُستخدم مصادر إضاءة تقليدية مثل مصابيح الزئبق أو الزينون في هذه المجاهر، بينما تستخدم بعض الأنظمة المتقدمة مصابيح LED أو مصادر ليزرية لتوفير إضاءة أكثر كفاءة ودقة

 يبين الشكل أدناه مكونات المجهر الفلوري الأساسية، والتي تتضمن مصدر الضوء، الفلاتر الانتقائية، والمرايا الثنائية الاتجاه. ويساهم انبعاث الألوان المختلفة من العينة في تكوين صورة ملونة. يمكن الحصول على ألوان متنوعة من خلال دمج الإشارات المنبعثة من الفلوروفورات المختلفة.

لكي تكون العينة مرئية باستخدام المجهر الفلوري، يجب أن تكون مُعلمة بعلامات فلورية. وهناك عدة طرق لتحقيق ذلك، من بينها صبغ العينات بالأصباغ الفلورية أو التعبير الجيني عن بروتينات فلورية. تُعد الأصباغ الفلورية مثل DAPI وHoechst من أبرز الأصباغ المستخدمة، حيث ترتبط بالحمض النووي (DNA) لتصوير أنوية الخلايا.

بالإضافة إلى ذلك، يمكن تحويل العديد من الجزيئات مثل الببتيدات والسموم والأدوية إلى صيغ فلورية لاستخدامها في التصوير. كما تعتبر تقنية المناعة الفلورية (Immunofluorescence) من الطرق الشائعة، حيث تستخدم الأجسام المضادة المرتبطة بأصباغ فلورية لاستهداف المستضدات داخل الخلايا بشكل انتقائي ودقيق.

يُظهر الشكل أدناه مثالًا على الصور التي تم التقاطها باستخدام المجهر الفلوري، موضحًا إمكانياته العالية في تصوير التراكيب الخلوية المختلفة.

بفضل هذه التقنية، أصبح بإمكان الباحثين دراسة التعبير الجيني، والتفاعلات البروتينية، والعمليات الجزيئية الأخرى بدقة عالية داخل الخلايا، مما يجعل المجهر الفلوري أداة لا غنى عنها في الأبحاث الحديثة.
في مرفق ماكس للتصوير، يتم تنفيذ تقنيات التصوير الفلوري باستخدام ملونات مثل DAPI وHoechst، إلى جانب تقنيات صبغ أخرى، بأعلى مستويات الجودة والدقة.