مایکرۆسکۆپی کۆنفۆکاڵی

پێشەکی

مایکرۆسکۆپی کۆنفۆکاڵی تەکنیکێکی پێشکەوتووی وێنەگرتنە کە پشت بە تایبەتمەندی فلۆرۆسەنسی نموونەیەک دەبەستێت. بە شێوەیەکی سەرەکی بۆ دروستکردنی وێنەی وردی بەرزی پێکهاتە وردەکان بەکاردێت، ئەمەش وایکردووە کە ئامرازێکی سەرەکی بێت لە توێژینەوە بایۆلۆژی و پزیشکییەکاندا. مایکرۆسکۆپی کۆنفۆکاڵی بە بەکارهێنانی تیشکی لەیزەری تەسک بۆ ڕووناککردنەوەی نموونەکە کاردەکات. مۆلیکولە فلۆرۆسەنتەکانی ناو نموونەکە وروژێنرێن بۆ دەردانی ڕووناکی، کە بە عەدەسەی ورد کۆدەکرێتەوە. تەکنیکەکانی فلتەرکردنی بینایی بەکاردەهێنرێن بۆ کەمکردنەوەی ژاوەژاو و تێکەڵاوبوون، ئەمەش ڕێگە دەدات وێنەکان لە چینە تایبەتەکانەوە لەناو نموونەکەدا بگیرێت.

یەکێک لە بەکارهێنانە دیارەکانی مایکرۆسکۆپی کۆنفۆکاڵی وێنەگرتنی خانە بایۆلۆژییەکان و نموونەکانە. دوای ڕەنگکردنی نموونەکە بە بۆیەی فلۆرۆسەنت، دەتوانرێت بە وردی لێکۆڵینەوە لە پێکهاتە خانەییەکان و پێکهاتەکانیان بکرێت. ئەم تەکنیکە بەکارهێنەران دەتوانن وردەکارییە ئاڵۆزەکانی وەک کارلێکی خانەیی و پێکهاتەی وردی ئەندامەکان چاودێری بکەن.

سوودەکانی پێوانەکردن

مایکرۆسکۆپی کۆنفۆکاڵی کە بە مایکرۆسکۆپی سکانکردنی لەیزەر ناسراوە، جۆرێکی پێشکەوتووی مایکرۆسکۆپی فلۆرۆسەنسە کە تایبەتمەندی فلۆرۆسەنسی نموونەکە بەکاردەهێنێت بۆ بەرهەمهێنانی وێنەی ورد. لە بوارەکانی پزیشکی و بایۆتەکنەلۆژیادا سەرنجێکی بەرچاوی بەدەستهێناوە، توێژەران خەڵاتی نۆبڵی کیمیایان لە ساڵی ٢٠١٤ وەرگرتووە بۆ پەرەپێدانی سیستەمی کۆنفۆکاڵی وردبینی بەرز.

بۆ ئەوەی گونجاو بێت بۆ وێنەگرتن بە بەکارهێنانی کۆنفۆکال یان هەر مایکرۆسکۆپی فلۆرۆسەنسی تر، نموونەکە دەبێت تایبەتمەندی فلۆرۆسەنس پیشان بدات. تەکنیکە جۆراوجۆرەکان هەیە بۆ بەرهەمهێنانی نموونەی فلۆرۆسەنت، باوترینیان بریتییە لە نیشانەدان بە بۆیەی فلۆرۆسەنت. لە حاڵەتی خانە بایۆلۆژییەکان و نموونەکاندا دەتوانرێت دەربڕینی پڕۆتینی فلۆرۆسەنت بەکاربهێنرێت. ئەگەر نموونەیەک فلۆرۆسەنسی ناوەکی هەبێت، دەتوانرێت ڕاستەوخۆ وێنەی بگیرێت بەبێ پێویستی بە بۆیاخ.

زۆرێک لە بۆیەی فلۆرۆسەنت بەردەستە بۆ زیادکردنی تایبەتمەندی فلۆرۆسەنس بۆ پێکهاتە بایۆلۆژییەکان، لەوانە:

DAPI: بۆ ڕەنگکردنی DNA بەکاردێت.

Hoechst: هەروەها بۆ ڕەنگکردنی DNA بەکاردێت و توانای چوونە ناو پەردەی خانەکانی هەیە.

DRAQ5 و DRAQ7: بەکاردێت بۆ ڕەنگکردنی خانە زیندووەکان و پێدانی زانیاری دەربارەی خانەکان و پێکهاتەکانیان.

مایکرۆسکۆپی کۆنفۆکاڵی بە توانای ڕەتکردنەوەی ڕووناکی دەرەوەی فۆکەس جیا دەکرێتەوە، ئەمەش ڕوونی وێنە فلۆرۆسەنتەکان بە شێوەیەکی بەرچاو باشتر دەکات بە بەراورد بە مایکرۆسکۆپی فلۆرۆسەنسی تەقلیدی. ئەمەش بە بەکارهێنانی کونێکی بچووکی پێن لە تەختەی فۆکەسدا بەدەست دێت، کە یارمەتی نەهێشتنی ڕووناکی دەدات لە دەرەوەی ناوچەی فۆکەسی.

ئەم تایبەتمەندییە ڕێگە بە دروستبوونی وێنەی سێ ڕەهەندی پێکهاتەکانی نموونە دەدات بە سکانکردن لە قووڵایی جیاوازدا، ئەمەش ڕوونی و ڕوونی وێنەکە بەرز دەکاتەوە، بەتایبەتی لە قووڵاییدا.

سوودە سەرەکییەکانی:

توانای چوونە ناو قووڵایی نموونەکە بە ڕوونییەکی بەرز.

توانای پێکهێنانی وێنەیەکی سێ ڕەهەندی لە پێکهاتە لێکۆڵینەوەکراوەکان.

جۆرەکانی نموونەی گوونجاو بۆ پێوانەکردن

1. شانە بایۆلۆجیەکان: شانەکانی ئاژەڵ و ڕووەک دوای ڕەنگکردن بە مادەی فلۆرۆسەنت، لەوانەش خانە زیندوو و کشتوکاڵییەکان.

2. نانۆماددە: نانۆگەردیل و فیلمی تەنک کە بە مادەی فلۆرۆسەنت ڕەنگ کراوە.

3. پۆلیمرەکان: نموونەی پۆلیمرەکان کە شەفاف و تەنکن، ڕێگە بە تێپەڕبوونی ڕووناکی دەدەن.

4. پێکهاتە کیمیاییەکان: ئەو ماددە کیمیاییانەی کە تایبەتمەندی فلۆرۆسەنت نیشان دەدەن، ئەمەش ڕێگە بە توێژینەوە دەدات بە بەکارهێنانی مایکرۆسکۆپی کۆنفۆکاڵی.

5. دەرمان: ئەو فۆرمولاسیۆنانەی کە مادەی فلۆرۆسەنتیان تێدایە، وەک ئەو دەرمانانەی کە لە توێژینەوەی بایۆلۆجیدا بەکاردەهێنرێن.

6. مادەی ژینگەیی ڕەق: کریستاڵ یان مادەی ڕەق کە بە بۆیەی فلۆرۆسەنت ڕەنگ کراوە.

مەرجەکانی پێوانەکردن

1. درێژی شەپۆلی وروژاندن: درێژی شەپۆلی وروژاندن (ڤۆڵتیە) بۆ فلۆرۆسەنس دەبێت لە ماوەی ±5 نانۆمەتر لە درێژی شەپۆلی دیاریکراودا بێت.

2. ڕەنگەکانی بەکارهێنراو: وێنەگرتن دەتوانرێت بە زۆرترین دوو ڕەنگی جیاواز ئەنجام بدرێت، لە سپێکتریمی سەوز و سووردا. بۆیە پێویستە لە کاتی هەڵبژاردنی بۆیاخەکاندا دووری لۆژیکی نێوان درێژی شەپۆلەکان لەبەرچاو بگیرێت.

تایبەتمەندییە نموونەییەکان

1. پێویستە نموونەکە شەفاف بێت (ڕێگەپێدانی ڕووناکی) و تەنک بێت (زۆرترین ئەستووری 50 مایکرۆمەتر).

2. خانە لکاوەکان پێویستە لەسەر سلایدێک کشتوکاڵ بکرێن لەبری قاپ یان فلاسک.

3. دوور بکەوەرەوە لە مۆرکردنی نموونەکە لە نێوان سلاید و کۆڤەرسلیپ.

4. نابێت گلیسیرین یان مادەی هاوشێوەی لە نموونەکەدا بکرێت.

5- پێویستە نموونەکە بە شێداری بمێنێتەوە و لە ژینگەیەکی بێهێزی بافەردا بگەیەنرێت.

6. پێویستە نموونەکە لە تاریکیدا ئامادە بکرێت و لە کاتی گواستنەوە بۆ تاقیگە لە تاریکیدا هەڵبگیرێت.

7. پێویستە نموونەکە پێشتر لە ژێر مایکرۆسکۆپی فلۆرۆسەنسدا پشکنین بۆ کرابێت، و وێنەی دەرەنجامی دەبێت پێش دانیشتنی وێنەگرتنی کۆنفۆکاڵی قبوڵکراو بێت.

شیکارکردنی ئەنجامەکان

1. لێکدانەوەی وێنە

ڕوونی و کۆنتراست: پێویستە ڕوونی و کۆنتراستی وێنە بپشکنرێت. وێنە کوالیتی بەرزەکان وردەکاری پێکهاتەیی ورد پیشان دەدەن، لە کاتێکدا کۆنتراستی کەم ڕەنگە ئاماژە بێت بۆ کێشەی ڕووناکی یان تێکەڵاوبوون.

قووڵی: توانای وێنەگرتن لە قووڵاییە جیاوازەکاندا دەتوانرێت بەکاربهێنرێت بۆ دیاریکردنی پێکهاتەی سێ ڕەهەندی نموونەکە. پێویستە وێنەکانی ئاستە جیاوازەکان شیبکرێنەوە بۆ تێگەیشتن لە دابەشبوونی خانەکان یان پێکهاتەکان.

2. شیکاری فلۆرۆسەنس

دابەشکردنی فلۆرۆسەنس: دابەشبوونی بۆیەی فلۆرۆسەنت لەناو نموونەکەدا پێویستە پشکنین بۆ بکرێت. دابەشبوونی نایەکسان لەوانەیە ئاماژە بێت بۆ کارلێکە بایۆلۆژییەکان یان گۆڕانکاری پێکهاتەیی.

چڕی فلۆرۆسەنس: شیکردنەوەی چڕی فلۆرۆسەنس دەتوانێت یارمەتیدەر بێت لە خەمڵاندنی بڕی پڕۆتین یان مۆلیکولە تایبەتەکان لە نموونەکەدا.

3. وردبینی و قووڵی

شیکاری قووڵی: دەتوانرێت تەکنەلۆژیای وێنەگرتنی چیندار (Z-Scan) بەکاربهێنرێت بۆ هەڵسەنگاندنی گۆڕانکارییەکانی فلۆرۆسەنس لە سەرانسەری قووڵی نموونەکەدا، کە یارمەتیدەرە لە تێگەیشتن لە پێکهاتە ناوخۆییەکان.

4. نەرمەکاڵا و شیکاری چەندایەتی

نەرمەکاڵا تایبەتمەندەکان دەتوانن یارمەتیدەر بن لە شیکاری وێنەی چەندایەتی، وەک پێوانەکردنی ناوچەکان، دابەشکردنی گەردیلەیی و پارامێتەرەکانی تری پەیوەندیدار.

دەتوانرێت شیکاری ئاماری ئەنجام بدرێت بۆ دیاریکردنی جیاوازی نێوان نموونە جۆراوجۆرەکان یان بارودۆخی تاقیکاری.

5. لێکدانەوەی بایۆلۆجی

ئەو ئەنجامانەی لە وێنەگرتنەوە بەدەست دەهێنرێن پێویستە پەیوەست بکرێن بە شیکارییە بایۆلۆژییە فراوانترەکانەوە. دەتوانرێت دۆزینەوەکان بەکاربهێنرێت بۆ تێگەیشتن لە کارلێکەکانی خانەیی، هەڵسەنگاندنی کاریگەرییەکانی چارەسەرکردن، یان لێکۆڵینەوە لە دیاردە بایۆلۆژییە جیاوازەکان.

گرنگە شیکارکار زانیاری تەواوی هەبێت لەسەر چۆنیەتی لێکدانەوەی ئەنجامەکان و مامەڵەکردن لەگەڵ هەر گۆڕانکارییەک یان لادانێک کە لەوانەیە سەرهەڵبدات. زانیاری بەنرخی تر کە دەتوانێت ببێتە هۆی پێشکەوتن لە توێژینەوە و پەرەپێدان دەتوانرێت لە ڕیی پەیوەندیکردن لەگەڵ پسپۆڕانی سەنتەری فۆتۆن دەستەبەر بکرێت.