تەکنیکی گواستنەوەی کارەبایی

پێشەکی:

بۆ بینینی نموونەکان لەسەر جێڵ، کاتێک لە کونەکاندا دانراون، ڕەنگە بینراوەکان لەژێر ڕووناکی ئەسمەری بەکاردێن وەک بۆیەی DNA (DNA Safe Stain). لە ڕابردوودا، ئیتیدۆم برۆماید (Ethidium Bromide) بۆ ڕەنگکردن بەکاردەهات، بەڵام بەهۆی ژەهراویبوون و خاسیەتە گۆڕانکارییەکانیەوە، کارکردن پێی لە تاقیگەکاندا قەدەغەکرا. دوای تەواوبوونی جووڵەی گەردیلەکان بەرەو قوتبی پێچەوانە، کارەبا دەبڕدرێت و جێڵەکە بە ئامێرێک وێنەدەگیرێت کە بە Gel Doc ناسراوە.

بەم تەکنیکە، بەکارهێنەر دەتوانێت گەردیلەکانی DNA بە درێژی جیاواز دیاری بکات. بەو پێیەی گەردیلەکانی DNA بارگەی نێگەتیڤیان هەیە، کاتێک لەسەر جێڵ دانراون و لەژێر کاریگەری کارەبادان، بەرەو قوتبی پۆزەتیڤ دەجوڵێن. لەم حاڵەتەدا، گەردیلەکانی DNA تەنها لەسەر بنەمای قەبارەکەیان جیادەکرێنەوە. ڕیسمانە کورتەکانی DNA بە خێرایی زیاتر دەجوڵێن بەراورد بە گەردیلە درێژەکان، بۆیە جیاکردنەوەی گەردیلەکان بە قەبارەی جیاواز ئاسانترە. وەک پێشتر ئاماژەمان پێدا، نموونەکان بە زیادکردنی ڕەنگە فلۆریەکان بۆ کونەکانی جێڵ شوێنپێکەوتن دەکرێن. هەندێک بەکارهێنەر ڕەنگە فلۆریەکان لەگەڵ جێڵەکەدا تێکەڵدەکەن پێش گواستنەوەی بۆ قاڵبی ئەلیکترۆفۆرێز (Electrophoresis)، واتە پێویست نییە ڕەنگ زیاد بکرێت لەکاتی بارکردنی نموونەکاندا. ئەلیکترۆفۆرێز بۆ گەردیلەکانی DNA بە شێوەی ئاسۆیی ئەنجامدەدرێت، کە ڕێگەیەکی سادەترە بەراورد بە ڕێگای ستوونی.

دوای وەستانی کارەبا، سپێکترەکانی گەردیلەکانی DNA بە قەبارەی جیاواز لەسەر جێڵ دەردەکەون، و بۆ دیاریکردنی قەبارەی سپێکترەکانی نموونە، نیشانەیەک یان ئەوەی بە Ladder ناسراوە وەک پێوەرێک بەکاردێت. نیشانەکانی Ladder لەسەر جێڵ وەک هێڵە باریکەکان بە درێژی دیاریکراو دەردەکەون، و لە ڕێگەیانەوە دەتوانرێت قەبارەی سپێکترەکانی نموونەکان لەسەر جێڵ هەڵسەنگێنرێت.